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A tripanossomíase bovina é uma doença causada por hemoparasitas e transmitida na América Latina principalmente por moscas picadoras da família Tabanidae. O objetivo do estudo foi avaliar a infecção por <em>Trypanosoma vivax</em> e <em>Trypanosoma evansi</em> em gado bovino especializada em produção de leite em uma fazenda e seus potenciais vectores. Se realizou um estudo parasitológico e entomológico direto por técnicas de microscopia e reação em cadeia da polimerase (PCR) com dois marcadores moleculares para diferenciar espécies de <em>Typanosoma</em> em amostras de sangue de bovinos e moscas. A frequência de infecção por <em>Trypanosoma vivax</em> e <em>Trypanosoma evansi</em> em bovinos foi de 3,6 e 0 %, respectivamente. A caracterização de vetores mostra a <em>Haematobia irritans</em> como a mosca mais frequente na zona de estudo (97,1 %), seguida de <em>Stomoxys calcitrans</em> (2,8 %). Não se identificaram tabanídeos. Se encontrou <em>T. vivax</em> e <em>T. evansi</em> em proboscídea e tórax-abdômen das moscas picadoras <em>Haematobia irritans</em> e <em>Stomoxys calcitrans</em>, o que representa um comportamento epizoótico atípico ao que sucede em países da América do Sul. Por sua alta densidade populacional, se sugere a mosca <em>Haematobia irritans</em> como o principal potencial vetor.
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